Zespół długiego QT, zespół Brugadów i choroba układu przewodzącego są powiązane z pojedynczą mutacją kanału sodowego czesc 4

Przeciek i przejściowy przebieg prądu jednokanałowego zostały zmniejszone przez odjęcie. Bieżące próby zostały zeskanowane, a pomiary zerowe zostały uśrednione i odjęte z każdej próby. Podstawową i jednokanałową amplitudę wyznaczono z histogramu cyfrowych prądów. Próg detekcji jednokanałowej został ustawiony na 0,5 × na pojedynczą amplitudę prądu. Histogram czasu otwarcia był dopasowany do pojedynczej funkcji wykładniczej. Wartości są podawane jako średnie. SE, o ile nie zaznaczono inaczej. Porównania przeprowadzono, stosując odpowiednio niesparowane lub sparowane testy t lub ANOVA. Wyniki Mutant typu dzikiego i. 1500, K1500E, K1500Q i. K1499. podjednostki wyrażały prąd kilku nanoamperów w komórkach 293-EBNA. Początkowo określiliśmy parametry bramkowania w równowadze komórek wyrażających dzikie i spontaniczne zmutowane kanały. Relacje dostępności i aktywacji napięcia typu dzikiego i 1500 są podsumowane na Figurze 3. V1 / 2h przesunięto z. 84,5. 1,3 mV (n = 9) w typie dzikim do 97,9. mV (n = 13) w mutacji 1500. Współczynnik nachylenia wzrósł z 4,8. Od 0,1 do 6,2. 0,1 mV. Przesunięcie w V1 / 2h zmniejszało h. od 0,72 w typie dzikim do 0,23 w mutacji 1500 przy normalnym potencjale spoczynkowym komórki komorowej, powodując utratę funkcji. Relacja aktywacja-napięcie została przesunięta w przeciwnym kierunku: V1 / 2m zmniejszyło się z. 47. 1,5 do. 44. 0,3 mV. Współczynnik pochylenia został prawie podwojony: 7,5. 0,4 mV w typie dzikim i 13. 0,3 mV w zmutowanym. 1500. Przesunięcia parametrów bramkowania były znaczące. Reprezentatywne nagrania bieżące przedstawiono na rysunku 3, c. F. Figura 3 Przesunięcia kinetyki bramkowania związane z mutantem 1500. (a) Dostępność kanału Na + określono przy pulsach 500 ms dla różnych potencjałów, po których impulsy testowe osiągnęły wartość ~ 20 mV. Próby impulsów testowych znormalizowano i wykreślono względem potencjału kondycjonującego. Parametry bramkowania uzyskano z pasowań z funkcjami Boltzmanna. V1 / 2h wynosił. 84,5. 1,3 mV (n = 9) dla typu dzikiego i 97,9. mV (n = 13) dla mutanta 1500; współczynnik nachylenia wynosił 4,8. 0.1 i 6.2. 0,1 mV, odpowiednio. (b) Prądy aktywacyjne uzyskano dla impulsów testowych o potencjale utrzymującym wynoszącym. 100 mV. V1 / 2h wynosi. 47,5. 1,5 mV dla typu dzikiego i 49,5. 0,3 mV dla ~ 1500; współczynnik nachylenia wynosił 7,5. 0.4 i 13. 0,3 mV, odpowiednio. (c. f) Reprezentatywne bieżące zapisy z komórek eksprymujących zmutowany typ (c i d) i. 1500 zmutowany kanał (e i f). (c i e) Prąd otrzymany przy potencjale testowym. 20 mV po depolaryzacji kondycjonującej do A 140 i. 90 mV. (d i f) Prądy uzyskane przy potencjałach testowych . 40 i 20 20 mV z potencjału utrzymującego . 100 mV. W niektórych mutacjach zespołu Brugadów negatywne przesunięcie w dostępności kanału Na + jest związane z istotną zależną od zastosowania redukcją prądu podczas stymulacji pulsu (12, 23). Zbadaliśmy wpływ 40-ms impulsów przyłożonych od około 100 do około 20 mV przy różnych długościach cyklu. Wyniki dla długości cyklu 90 ms podsumowano na Figurze 4a; Prądy z jednego eksperymentu zilustrowano na rysunku 4b. Pomimo stałej dostępności na poziomie zaledwie 0,58 przy ~ 100 mV, nie zaobserwowaliśmy żadnej zależnej od zastosowania redukcji prądu Na + z mutantem 1500. Przeprowadziliśmy cztery dodatkowe eksperymenty z pociągami o impulsach 100 ms (długość cyklu 150 ms) i zaobserwowaliśmy podobne wyniki (prądy z jednego eksperymentu zilustrowano na rysunku 4c). Wyniki sugerują, że odzysk z inaktywacji musi być niezwykle szybki w zmutowanym kanale 1500. Dwie miary inaktywacji kanału Na + przedstawiono na fig. 5. Pomiary uzyskane z sekwencjami kondycjonowania i testowania pulsu przedstawiono na fig. 5a; te uzyskane z pojedynczych wykładniczych pasowań do relaksacji prądu całej komórki przedstawiono na rysunku 5b. Przy potencjałach kondycjonujących . 140, 120 120 i 100 100 mV, stała czasowa odzysku od inaktywacji została określona przez zastosowanie dwudziestu 40 ms impulsów od potencjału kondycjonowania do ą 20 mV. Przy potencjale kondycjonującym wynoszącym> 90 mV, używaliśmy pojedynczego impulsu 40 ms do ~ 20 mV. Po zmiennym okresie regeneracji zastosowano impuls testowy do ą 20 mV. Prąd impulsu testowego wykreślono w funkcji interwałów regeneracji. Stałe czasowe wyprowadzone z pojedynczych wykładniczych pasowań do procesu odzyskiwania są przedstawione na Rysunku 5a. Przy potencjałach kondycjonujących a-80, A70 i A-60 mV rozwój inaktywacji oceniano za pomocą pojedynczego impulsu o zmiennym czasie trwania do odpowiedniego potencjału kondycjonującego, a następnie impulsu testowego do ~ 20 mV. Szczytowy prąd impulsu testowego wykreślono w funkcji czasu impulsu kondycjonującego, a stałą czasową rozwoju inaktywacji określono z pojedynczych pasm wykładniczych.
[podobne: najlepsza odzywka do rzes, ciasto marchewkowe wegańskie, kimura chwyt ]
[hasła pokrewne: centermed słoneczna tarnów, fundacja dzieciom zdążyć z pomocą logowanie, masaż nuru na czym polega ]