Hamowanie PKC łagodzi fenotyp serca w mysim modelu dystrofii miotonicznej typu 1 cd

Stwierdziliśmy, że myszy, które otrzymały Ro-31-8220, zachowały wyższy stosunek HW / BW, co sugeruje, że szlak PKC może nie być zaangażowany w ten składnik fenotypu. Ogólnie, wyniki te wskazują, że Ro-31-8220 znacząco zmniejszył śmiertelność spowodowaną przez rozszerzone CUG RNA, bez wpływu na poziom ekspresji. Ro-31-8220 zapobiega aktywacji PKC i zmniejsza hiperfosforylację CUGBP1 i regulację w górę. Aby określić, czy Ro-31-8220 hamuje aktywację PKC (3 / P II, zastosowaliśmy przeciwciało fosfo-specyficzne (Thr638 / 641) w celu określenia poziomu aktywowanych izoform PKCa / p II w porównaniu z całkowitym PKC3. W nieobecności Ro-31-8220, PKCa / P II aktywowano w tkankach serca od myszy eksprymujących EpA960. Read more „Hamowanie PKC łagodzi fenotyp serca w mysim modelu dystrofii miotonicznej typu 1 cd”

Uszkodzenie DNA jest nową odpowiedzią na subiektywne uszkodzenie indukowane przez C5b-9a dopełniacza w podocytach cd

Podocyty pozostawiono do wzrostu przez 3. 4 dni w celu włączenia 3H-tymidyny do DNA. Po stymulacji za pomocą Ab i C + lub C. surowicy, podocyty inkubowano w pożywce przez 30 minut do 24 godzin, a następnie rozpuszczono stosując bufor do lizy. KCl (12 M) dodano do zlizowanych komórek i inkubowano w temperaturze 65 ° C przez 10 minut, zamrażano przez 5 minut, a następnie odwirowano przy 3200 g w celu oddzielenia wytrąconego DNA chromatyny z uszkodzonego DNA (supernatant). Read more „Uszkodzenie DNA jest nową odpowiedzią na subiektywne uszkodzenie indukowane przez C5b-9a dopełniacza w podocytach cd”

Zespół długiego QT, zespół Brugadów i choroba układu przewodzącego są powiązane z pojedynczą mutacją kanału sodowego ad

Fosforylacja zależna od PKC jest wymagana do modulacji zależnej od PKA kanału Na + (16). Wyraziliśmy. 1500 i pokrewne mutacje K1500E, K1500Q i. K1499 w komórkach 293-EBNA. Funkcjonalne zaburzenia w bramkowaniu kanałowym mogą uwzględniać wszystkie trzy fenotypowe warianty mutacji. Read more „Zespół długiego QT, zespół Brugadów i choroba układu przewodzącego są powiązane z pojedynczą mutacją kanału sodowego ad”

Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii

Lipodystrofia charakteryzuje się całkowitym lub częściowym brakiem tkanki tłuszczowej, opornością na insulinę, stłuszczeniem wątroby i niedoborem leptyny. Tutaj pokazujemy, że lepty centralna niskiej dawki koryguje oporność na insulinę i stłuszczenie wątroby myszy lipodystroficznych aP2-nSREBP-1c, podczas gdy ta sama dawka podana peryferycznie nie. Centralna leptyna również represjonowała RNA stearoilo-CoA desaturazy-1 (SCD-1) i aktywność enzymatyczną, które zwiększały się w wątrobach myszy lipodystroficznych. Myszy aP2-nSREBP-1c homozygotyczne pod względem delecji SCD-1 znacznie zmniejszyły stłuszczenie wątroby, zwiększenie nasyconych kwasów tłuszczowych, zmniejszoną aktywność karboksylazy acetylo-CoA i obniżone poziomy malonylo-CoA w wątrobie. Pomimo zmniejszenia stłuszczenia wątroby myszy te pozostały cukrzykami. Read more „Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii”

Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy

Kanały potasowe (K +) w wewnętrznej błonie mitochondrialnej wpływają na funkcję i przeżycie komórek. Coraz więcej dowodów wskazuje, że wiele szlaków sygnałowych i działania farmakologiczne zbiegają się na mitochondrialnych, wrażliwych na ATP kanałach K + (mitoKATP) i PKC w celu nadania ochrony cytoprotekcyjnej przed martwiczym i apoptotycznym uszkodzeniem komórki. Jednak struktura molekularna kanałów mitoKATP pozostaje nierozwiązana, a mitochondrialne fosfoproteiny, które pośredniczą w cytoprotekcji przez PKC, pozostają do ustalenia. Ponieważ myszy z niedoborem białka głównego koneksyna 43 (Cx43) ze złączem sarcolemmal nie posiadają tej ochrony cytologicznej, postanowiliśmy zbadać możliwe powiązanie między mitochondrialną Cx43, funkcją kanału mitoKATP i aktywacją PKC. Poprzez zaciśnięcie łaty wewnętrznej błony podskórnej mysiej serca mitochondriów, odkryliśmy, że genetyczny niedobór Cx43, hamowanie farmakologicznej koneksyny przez karbenoksolon i blokowanie Cx43 przez mimetyk peptyd 43GAP27, zasadniczo zmniejszają zależną od diazoksydów stymulację kanałów mitoKATP. Read more „Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy”

Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy ad 8

Po standardowym Laemmli SDS-PAGE (12%) i analizie Western blot (Bio-Rad Tankblot system, membrana nitrocelulozowa) wykryto białka przy użyciu następujących pierwszorzędowych przeciwciał: Cx43 (1: 5000, królicze poliklonalne, ab11370, Abcam), GAPDH (1 : 200, królicze poliklonalne IgG, sc-25778, Santa Cruz Biotechnology Inc.), Na + / K + -ATPazy (1: 1000, królicze poliklonalne IgG, nr 3010, Cell Signaling Technology Inc.), retikulum sarkoplazmatyczne Ca2 + gen 2 pompy ( SERCA2A; 1: 100, kozie poliklonalne IgG, sc-8094, Santa Cruz Biotechnology Inc.), zależny od napięcia kanał anionowy (VDAC; 1: 1000, królicze poliklonalne IgG, nr 4866, Cell Signaling Technology Inc.), rozdzielające białko 2 (UCP2; 1: 100, kozie poliklonalne IgG, sc-6525, Santa Cruz Biotechnology Inc.), dysmutazą ponadtlenkową manganu (MN-SOD, 1: 1000, króliczą poliklonalną IgG, Upstate), fosforylowaną Cx43 przy serynie 368 (Cx43Ser368; 1: 500, królicze poliklonalne IgG, Cell Signaling Technology Inc.) i przeciwciało drugorzędowe z króliczej peroksydazy chrzanowej (1: 2,000, Sigma-Al drich). Inkubacje pierwotnych przeciwciał przeprowadzono przez noc w 4 ° C. Immunoreaktywne prążki barwiono odczynnikami ECL (Amersham Pharmacia Biotech) zgodnie z instrukcjami producenta. Analizę densytometryczną indukcji białka przeprowadzono przy użyciu kamery CCD (Raytest) z oprogramowaniem do analizy densytometrycznej AIDA (Raytest). Każdy Western blot przeprowadzono trzykrotnie, o ile nie wskazano inaczej. Read more „Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy ad 8”

Transport i wykrywanie glukozy w utrzymaniu homeostazy glukozy i harmonii metabolicznej ad 7

Dodatkowo, glukoza pobrana do mięśnia może zostać przekształcona w alaninę, która służy (a) jako główny substrat glukoneogenny stanowiący cykl glukoza-alanina; i (b) jako transporter azotu wytworzony przez rozpad białka z powrotem do wątroby w celu wydalenia w postaci mocznika (65, 66). Te i inne eksportowane metabolity pochodzące z glukozy służą jako sygnały dla innych narządów i mogą przekazywać informacje odzwierciedlające stan komórkowy ich tkanki pochodzenia. Ryc. 3 Cykle substratów jako sygnały pochodne glukozy. Węgiel wchodzący w tkankę mięśniową i tłuszczową jako glukoza może być całkowicie utleniony i pozostawić tkankę jako CO2 i H2O. Read more „Transport i wykrywanie glukozy w utrzymaniu homeostazy glukozy i harmonii metabolicznej ad 7”

Odzyskiwanie z cukrzycy u myszy regeneracja komórek ad 7

Ponadto, regeneracja może obejmować przejściowe odróżnicowanie. komórki, a następnie proliferacja i redokalizacja (42, 43), chociaż nasza obserwacja wielokrotnej proliferującej insuliny +. komórki argumentują przeciwko tej interpretacji. W szczególności, ostatnie badania śledzenia linii hodowanych. komórki znalazły mało dowodów na proliferację odróżnicowanych. Read more „Odzyskiwanie z cukrzycy u myszy regeneracja komórek ad 7”

Chimeryzm mieszany i tolerancja bez napromieniowania całego ciała w dużym modelu zwierzęcym ad 6

Stosując swoiste dla dawcy mAb klasy I, komórki dawcy wyraźnie obserwowano w regionie rdzeniastym. Podwójne barwienie za pomocą klasy I dawcy (niebieski) i cytokeratyny (brązowy) na Figurze 6d wykazało, że komórki dawcy w rdzeniu nie były komórkami nabłonkowymi, podczas gdy podwójne barwienie dla klasy I dawcy (niebieski) i klasy II świni (brązowe) ) na Figurze 6e wykazało, że komórki dawcy były pozytywne w klasie II, a ich morfologia była zgodna z typem komórek dendrytycznych (Figura 6e). U obu tych zwierząt obserwowano kliniczne objawy GvHD, w tym wysypkę skórną stopnia (2 i biegunkę, natychmiast po ustaniu podawania CyA. Wysypka skórna zniknęła spontanicznie u obu zwierząt. Jednak zwierzę nie. Read more „Chimeryzm mieszany i tolerancja bez napromieniowania całego ciała w dużym modelu zwierzęcym ad 6”

Indukcja inhibitora Cdk p21 przez LY83583 hamuje proliferację komórek nowotworowych w sposób niezależny od p53 ad 5

Zgodnie z indukcją starzenia komórkowego, hamowanie proliferacji przez LY było nieodwracalne po okresie leczenia trwającym dłużej niż 2 dni (Figura 1e). Rozbudowane leczenie HDF LY przez 8 dni nie spowodowało znacznego zmniejszenia liczby komórek z powodu śmierci komórki, ale skutkowało stabilnym hamowaniem proliferacji (Figura 1e). W celu scharakteryzowania zatrzymania cyklu komórkowego indukowanego przez LY, HDF zsynchronizowano w fazie G1 przez konfluencję (91,2% fazy G1 i 2% fazy S), a następnie uwolniono przez trypsynizację (Figura 1f); nietraktowane komórki weszły w fazę S z wysokim odsetkiem. Dodanie LY prawie całkowicie zablokowało wejście HDF do fazy S, co sugeruje, że LY działa podczas fazy G1 cyklu komórkowego. Ponadto dodanie 1. Read more „Indukcja inhibitora Cdk p21 przez LY83583 hamuje proliferację komórek nowotworowych w sposób niezależny od p53 ad 5”