Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii ad 8

Podobnie, myszy ob / ob pozbawione PPAR. W wątrobie występuje znaczna redukcja trójglicerydów w wątrobie, przy jednoczesnym zachowaniu odporności na hiperglikemię i insulinę (42). Zatem obniżenie zawartości triglicerydów w wątrobie u myszy z lipodystrofią może samo w sobie nie być wystarczające do skorygowania ich cukrzycy. Ta możliwość jest również zasugerowana przez naszą obserwację, że leptyna może poprawiać cukrzycę i poprawiać wątrobową wrażliwość na insulinę u zwierząt lipodystroficznych w dawkach, które nie korygują stłuszczenia wątroby do poziomów WT. Leptyna może poprawić cukrzycę w lipodystrofii przez mechanizm zależny od insuliny lub niezależny od insuliny. Read more „Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii ad 8”

Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii ad 7

Górny panel pokazuje reprezentatywne wyniki analizy immunoblotowej, a w dolnym panelu każdy słupek przedstawia średnią obliczoną na podstawie dwóch niezależnych eksperymentów. IB, immunoblot; IP, immunoprecypitacja; PY, fosfo-tyrozyna; Fosforan PI (3) P, PI (3). Dyskusja Leptyna ma silne działanie przeciwcukrzycowe i antyperspatotyczne w lipodystrofii człowieka i gryzoni (6, 9). Nasze odkrycia silnie sugerują, że efekty metaboliczne leptyny i jej działania na ekspresję genów wątroby w lipodystrofii są pośrednie poprzez CNS. Wniosek ten jest zgodny z danymi uzyskanymi w wyniku leczenia icv u myszy z niedoborem leptyny ob / ob i myszy WT (31). Read more „Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii ad 7”

Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii ad 6

Wcześniej sugerowano, że akumulacja nasyconych kwasów tłuszczowych w komórce może prowadzić do apoptozy (30). Dane te mogą sugerować, że zawartość lipidów i aktywność SCD-1 mogą również wpływać na. funkcja komórki lub żywotność. Poziomy triglicerydów, cholesterolu i FFA osocza nie ulegały zmianie u myszy abJ / abJ, aP2-nSREBP-1c w porównaniu z kontrolami PP2-nSREBP-1c (dane nie przedstawione). Leptyna poprawia działanie insuliny niezależnie od wpływu na stłuszczenie wątroby i aktywność SCD. Read more „Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii ad 6”

Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii ad 5

Ponieważ mięśnie są głównym miejscem pobudzenia glukozy stymulowanym insuliną, analizowaliśmy również profile ekspresji genów w mięśniach szkieletowych myszy transgenicznych a2-nSREBP-1c po podaniu icv i podskórnej leptyny. W przeciwieństwie do wpływu leptyny na ekspresję genów w wątrobie, ekspresja genu w mięśniu szkieletowym była w dużej mierze niezmieniona przez leptynę centralną i obwodową. Geny regulowane przez leptynę obejmowały główną grupę białka moczowego, dehydrogenazę acetylo-CoA, izomerazę dienoilo-CoA ECH1p i białko wiążące kwas 3-tłuszczowy 3. Zgodnie z innymi ustaleniami, korelacja między leptyną centralną i obwodową była stosunkowo mała (patrz Suplementowa Figura 1; http://www.jci.org/cgi/content/full/113/3/414/DC1) sugerująca, że leptyna może bezpośrednio wpływać na ekspresję genów w mięśniach, ale nie w wątrobie (16). SCD-1 w lipodystrofii. Read more „Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii ad 5”

Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy ad 6

Podczas gdy takie kanały mogą przewodzić potas i mogą być modulowane przez ATP (30), obecność kanałów mitoKATP w mitochondriach międzyfibrylowych bez Cx43 argumentuje przeciwko poglądowi, że Cx43 tworzy porowatość przewodzenia kanałów mitoKATP. Istnienie pory kanału, która jest odmienna od Cx43, jest dodatkowo wspierane przez niższą jednokanałową przewodność kanałów mitoKATP niż podano dla stanów pełnego i subprzewodnictwa koneksonów i połączeń luki (31). Przeciwnie, nasze wyniki pokazują, że Cx43 jest niezbędna do transdukcji sygnału cytoochronnego na kanałach mitoKATP, który jest 7-krotnie wspomagany, tj. Przez zmniejszoną reaktywność tych kanałów w obecności (a) farmakologicznego hamowania Cx43, (b) peptydów mimetycznych Cx43, (c) genetyczna heterozygotyczna supresja Cx43, (d) prawie całkowita redukcja Cx43 w warunkowych genetycznych myszach z knockdown Cx43, (e) addytywne działanie 43GAP27 z genetycznym Cx43 + /. supresja, (f) uratowanie wrażliwości na diazoksyd w Cx43 + /. Read more „Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy ad 6”

Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy ad 5

Wpływ stymulacji PKC przez PMA (2 MM) i peptyd selektywny epsilon R RACK (0,5 M M) na zachowanie jednokanałowe mitoKATP u dzikiego typu w porównaniu z Cx43 + / p Myszy W kardiomiocytach istnieją dwie populacje mitochondriów, tj. subkolemiczne mitochondria zlokalizowane pod błoną plazmatyczną i mitochondriami międzybibliowymi znajdowanymi między miofibrylarami (25). Ostatnio okazało się, że mitochondria międzybiblioteczne nie zawierają wykrywalnego Cx43 (12). Biorąc pod uwagę nasze obserwacje, że Cx43 przekazuje sygnały cytoochronne do kanałów mitoKATP, uzasadniliśmy zatem, że stymulacja kanałowa mitoKATP za pośrednictwem leków i PKC może być ograniczona do subkolemermalnych mitochondriów. W ten sposób oceniliśmy charakterystykę kanału i reaktywność mitoKATP w izolowanych międzywęzłowych mitochondriach myszy typu dzikiego. Read more „Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy ad 5”

Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy czesc 4

Biorąc pod uwagę, że sarcolemmal Cx43 jest celem PKC. (23) i PKC. jest konstytutywnie umiejscowiony w mitochondriach (24), uzasadniliśmy, że kanały mitoKATP mogą być aktywowane przez mitochondrialne PKC. i że efekt ten może być mediowany przez mitochondrialny Cx43. Zatem analizowaliśmy wpływ aktywacji PKC przez PMA (2. Read more „Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy czesc 4”

Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy cd

Podczas gdy antymycyna A (4 .g / ml), która stymuluje tworzenie ROS przez hamowanie kompleksu oddechowego III, zwiększyła nachylenie fluorescencji Amplex UltraRed zarówno w mitochondriach, jak i mitoplastach; ani DMSO ani diazoksyd rozpuszczalnika (200 .M) nie zmienił fluorescencji Amplex UltraRed w mitoplastach utrzymywanych w naszym roztworze typu patch-clamp (Figura 2, E i F), potwierdzając hipotezę, że w naszych warunkach eksperymentalnych diazoksyd nie miał istotnego niespecyficznego wpływu na mitochondria Produkcja ROS (18). Ponadto, zmiatacz ROS L-NAC (5 mM) nie zmieniał wyjściowych właściwości kanału mitoKATP i, w szczególności, nie łagodził indukowanej diazoksydem aktywacji kanału mitoKATP (Figura 2, C i D oraz Tabela 1), co wskazuje, że stymulacja Kanały mitoKATP przez diazoksyd nie są pośredniczone przez ROS. Ponieważ Cx43 znajduje się w wewnętrznej błonie mitochondrialnej (ryc. 1) (10, 12) i niedokrwienie lub farmakologiczne warunkowanie jest podważane przez niedobór Cx43 niezależnie od sprzężenia międzykomórkowego przez złącza luki (11), mieliśmy na celu ustalenie, czy mitochondrialny Cx43 może być niezbędny molekularny składnik przewodzących porów kanałów mitoKATP lub może przekazywać sygnały cytoochronne do tych kanałów. Aby zdefiniować rolę mitochondrialnego Cx43, zastosowaliśmy 4 uzupełniające podejścia, tj. Read more „Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy cd”

Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy ad

Prądy te można aktywować za pomocą diazoksydu otwierającego kanał mitoKATP (100 .M), który znacznie zwiększył prawdopodobieństwo otwarcia (Po, całkowite, 4,30%. 0,40%, n = 16, P <0,05) i średni czas otwarcia bez wpływu na pojedyncze amplituda kanału i konduktancja (rysunek 2A, rysunek 3, B, C i E oraz tabela 1). Kanały MitoKATP nie wykazywały zależnej od czasu aktywacji lub spływania (ciągły 9-sekundowy puls: Po, całkowity, 0,28%. 0,09% i 4,21%. 0,50% na początku i pod diazoksydem, n = 6). Read more „Connexin 43 działa jako cytoochronny mediator transdukcji sygnału przez stymulowanie mitochondrialnych kanałów KATP w kardiomiocytach myszy ad”

Transport i wykrywanie glukozy w utrzymaniu homeostazy glukozy i harmonii metabolicznej cd

W przeciwieństwie do specyficznych dla mięśni nadekspresorów GLUT1, poziomy insuliny są odpowiednio zmniejszane w odpowiedzi na podstawową hipoglikemię występującą w nadekspresorach GLUT4 specyficznych dla mięśnia / tłuszczu (12). Ponadto, nadekspresory GLUT4 specyficzne dla mięśnia / tłuszczu wykazują zwiększone usuwanie glukozy w odpowiedzi na insulinę podczas zaciskania, w przeciwieństwie do oporności na insulinę w specyficznych względem mięśni nadekspresorach GLUT1 (11). Dwa osobne modele z specyficzną dla mięśni nadekspresją GLUT4 wykazują fenotypy, które są ogólnie zgodne z właściwościami specyficznego względem mięśni / tłuszczu nadekspresora GLUT4, tj. Poprawioną tolerancją glukozy i reakcją na insulinę (13, 14). Te specyficzne względem mięśni modele nadekspresji GLUT4. Read more „Transport i wykrywanie glukozy w utrzymaniu homeostazy glukozy i harmonii metabolicznej cd”