Odzyskiwanie z cukrzycy u myszy regeneracja komórek ad

W obecności doksycykliny rtTA indukuje ekspresję DTA, powodując apoptozę komórek. Ponieważ pojedyncza cząsteczka DTA wystarcza, by zabić komórkę (26), subletalnie. uszkodzenie komórek nie było spodziewane. Eksperymenty kontrolne wykazały, że przy braku doksycykliny, myszy transgeniczne z podwójną transgeniczną insuliną rtTA; TET-DTA były nieodróżnialne od myszy typu dzikiego pod względem homeostazy glukozy, jak również histologii wysepek (Figura 1, Bd). Już 48 godzin po podaniu doksycykliny dorosłym myszom z podwójną transgenicznością, powszechna apoptoza jest ograniczona do. obserwowano komórki. Nie zaobserwowano apoptozy w wysepkach leczonych pojedynczych transgenicznych myszy z miotu (ryc. 1, E i F oraz uzupełniająca ryc. 1, materiał uzupełniający dostępny w Internecie za pomocą tego artykułu; doi: 10.1172 / JCI32959DS1). Te wyniki potwierdzają, że system ablacji był ściśle kontrolowany przez doksycyklinę i był. specyficzne dla komórki. Rysunek 1A transgeniczny system myszy do specyficznej i warunkowej ablacji trzustki. komórki. (A) Zastosowanie doksycykliny (Dox) do wody pitnej myszy Insulin-rtTA; TET-DTA indukuje ekspresję DTA specyficznie w. komórki, powodując apoptotyczne. śmierć komórki. (B) Normalna morfologia wysepek u 4-tygodniowej myszy z podwójną transgeniczną nietolerowaną doksycykliną. (C) Prawidłowe poziomy glukozy we krwi (mierzone w ciągu dnia) u 3-tygodniowych myszy w nieobecności doksycykliny. Nietraktowane myszy transgeniczne po 1,5 roku miały poziomy glukozy we krwi nie do odróżnienia od myszy dobranych wiekiem myszy dzikiego typu (nie pokazano). (D) W przypadku braku doksycykliny, 4-tygodniowe myszy z podwójną transgenicznością miały normalny poziom glukozy we krwi na czczo i tolerancję glukozy. Wartości są średnie. SD (n = 5. 7). Pojedyncze transgeniczne myszy z miotu TET-DTA są określane jako typu dzikiego. (E). Specyficzność komórkowa ablacji. Czterotygodniowe myszy leczono doksycykliną przez 48 godzin, a następnie uśmiercano i oceniano pod kątem śmierci komórek apoptotycznych. Rozległe. apoptozę komórek wykrywano przez barwienie TUNEL u myszy transgenicznych. Nie zaobserwowano apoptozy w nie-. komórki w wysepkach lub w zewnątrzwydzielniczej trzustce. Motyle jednotransgeniczne leczone doksycykliną nie wykazywały oznak apoptozy. (F) Kwantyfikacja. apoptoza komórek została wykryta 48 godzin po podaniu doksycykliny 4-tygodniowym myszom. Wartości są średnie. SD od 5-tygodniowych myszy eksponowanych na doksycyklinę przez 48 godzin przed uśmierceniem (n = 3 na grupę). Dla każdej myszy około 2000. komórki zostały policzone. Pręty skali: 100 .m. Oceniliśmy histologiczne i fizjologiczne konsekwencje. zabijanie komórek. Czterotygodniowe myszy leczono doksycykliną przez tydzień i uśmiercono w 5 tygodniu życia. Architektura wysepek w takich transgenicznych myszach została poważnie zakłócona, z nie-. komórki zlokalizowane w rdzeniu skurczonych wysepek, podczas gdy rdzeń wysepki był zwykle zajęty przez. komórki (Figura 2, A i B). Oznaczenie morfometryczne. masa komórek ujawniła utratę 70%. 80%. komórki w porównaniu z osobnikami z miotu kontrolnego (Figura 2, D i F). Zawartość insuliny w trzustce zmniejszyła się o około 85% (Figura 2G), a poziomy glukozy we krwi wzrosły do 300. 600 mg / dl, czyniąc myszy jawnie cukrzykami (Figura 2H). Nieznaczny, statystycznie nieistotny wzrost. odnotowano masę komórkową (dodatkowa Figura 4E). Rysunek 2Alacja i regeneracja. komórki. (A. C) Morfologia wysepek. Dzikie (A) i transgeniczne wysepki w nieobecności doksycykliny (ryc. 1B) wykazały typową organizację centralnej. komórki i urządzenia peryferyjne. komórki. Wysepki z 5-tygodniowych myszy transgenicznych traktowanych doksycykliną przez 7 dni (tj. Od 4 tygodnia życia) wykazywały zmniejszenie liczebności. komórki i fenotyp mieszanej wysepki z wieloma nie-. komórki w centrum (B). Dwadzieścia trzy tygodnie po wycofaniu doksycykliny (około 28 tygodnia życia) transgeniczne wysepki miały prawie idealną architekturę (C). Paski skali: 10 .m. (D. F) Ocena morfometryczna. masa komórek (D),. masa komórkowa znormalizowana do masy ciała (E) i część tkanki trzustkowej pokryta. komórki (F) u myszy w wieku 5- i 28-tygodniowym, które otrzymywały doksycyklinę między 4 a 5 tygodniem (n = 5. 11 na grupę). Zauważ znaczną spontaniczną normalizację. masa komórek u myszy transgenicznych w stosunku do myszy z miotu typu dzikiego poddawanych temu samemu traktowaniu. ** P <0,01. (G) Zawartość insuliny trzustkowej u myszy w wieku 5- i 28 tygodni, które otrzymywały doksycyklinę między 4 a 5 tygodniem (n> 3 na grupę). Wartości są średnie. SD. (H) Podawane poziomy glukozy we krwi po odstawieniu doksycykliny u myszy leczonych doksycykliną w okresie od 4 do 5 tygodni. (I) Tolerancja glukozy po długotrwałym (> 8 miesiącach) wyleczeniu z cukrzycy
[patrz też: mmacore, centermed słoneczna tarnów, nr na pogotowie ratunkowe ]
[hasła pokrewne: masaż nuru na czym polega, nr na pogotowie ratunkowe, ciasto z truskawkami moje wypieki ]