Odzyskiwanie z cukrzycy u myszy regeneracja komórek ad 5

Podobny odsetek oznaczonych komórek wskazuje, że komórki pochodzą głównie z proliferacji przetrwania. komórki. Wyniki doświadczenia podsumowano na Figurze 4D. W 5 niezależnych insulino-rtTA; TET-DTA; myszach transgenicznych z insuliną CreERTM; Z / AP związek, udział komórek HPAP + wśród nowych. komórki były podobne do ogólnej wydajności rekombinacji tej myszy. Innymi słowy, jeśli wydajność rekombinacji wynosi 100%, prawie wszystkie nowe. komórki byłyby HPAP +, potomstwo przetrwania. komórki, które rozmnożyły się. Proporcje nowych. komórki wśród populacji HPAP + były podobne do odsetka nowych. komórki wśród ogólnych. populacja komórek (inkorporacja BrdU w 21%> 24% obu rekombinowanych HPAP + i niereklonowanych komórek A). Jak pokazano na rysunku 4B, ten wynik wskazuje, że nowy. komórki w regenerujących się wysepkach pochodzą w znacznej mierze, a może wyłącznie, z. komórki, które przeżyły ablację. Nie ma dowodów na nowe. różnicowanie komórek z komórek macierzystych, ponieważ wiązałoby się to z niższym odsetkiem ekspresji HPAP w BrdU +. populacja komórek. Kiedy zmodyfikowano protokół eksperymentalny. komórki zostały hermitably oznakowane przed atakiem. ablację komórek, uzyskano podobne wyniki (danych nie pokazano). Podsumowujemy to. proliferacja komórek jest głównym źródłem nowych. komórki i może uwzględnić regenerację obserwowaną w tym modelu. Zmniejszają się supresanty immunologiczne. regeneracja komórek. To. system ablacji komórkowej zapewnia platformę przesiewową dla czynników i leków, które wpływają na. regeneracja komórek. Protokół Edmontona dotyczący przeszczepiania wysepek znacznie poprawił skuteczność przeszczepów ludzkich wysepek, w wyniku lepszych technik przygotowywania wysepek i stosowania niesteroidowych immunosupresantów Sirolimus (znanego również jako rapamycyna) i takrolimusu (znanego również jako FK-506) (28 ). Jednak większość pacjentów traci funkcję przeszczepu w czasie, zjawisko zwykle przypisywane allo- lub autoimmunizacji (29. 31). Użyliśmy naszego systemu warunkowej ablacji-regeneracji, aby zapytać, czy te leki mogą dodatkowo przeszkadzać. regeneracja komórek. Transgeniczne myszy otrzymywały cukrzycę przez podawanie doksycykliny od urodzenia do miesiąca, a następnie pozwalano im na powrót do zdrowia bez obecności lub obecności klinicznie istotnych dawek Sirolimusu i takrolimusu (SirTac, patrz Metody) (32, 33). Myszy uśmiercono 2 tygodnie po odstawieniu doksycykliny do obserwacji. proliferacja komórek lub 2 miesiące po odstawieniu doksycykliny w celu zaobserwowania zmian stężenia glukozy we krwi i. masa komórek. W poprzednim eksperymencie, BrdU dodawano do wody pitnej przez 2 tygodnie, aby udokumentować akumulację nowego. komórki. Jak pokazano na fig. 5, A (C, SirTac drastycznie zmniejszył. szybkość proliferacji komórek (frakcja komórek Ki67 +.), jak również. akumulacja komórek (frakcja komórek BrdU + A) u myszy z cukrzycą iw mniejszym stopniu u myszy typu dzikiego. Stawka. apoptoza komórek nie zwiększyła się po podawaniu SirTac (dane nie przedstawione), co sugeruje, że przy stosowanych dawkach wpływ tych leków. liczba komórek jest głównie poprzez zmniejszoną proliferację. Figura 5D pokazuje, że podczas gdy dzikie wysepki wydawały się rażąco normalne po 2 miesiącach. leczenie SirTac, architektura wysepek u myszy z cukrzycą leczonych za pomocą SirTac nie uległa normalizacji. W związku z tym. masa komórek u myszy leczonych SirTac nie wzrastała po odstawieniu doksycykliny (Figura 5E). W rezultacie myszy z cukrzycą traktowane SirTac nie normalizowały poziomu glukozy we krwi w okresie, w którym nieleczone współwystępujące mięśnie cukrzycowe odzyskiwały się spontanicznie (Figura 5F). Warto zauważyć, że przy stosowanej dawce i czasie myszy typu dzikiego otrzymujące SirTac pozostały normoglikemiczne. Wyniki wskazują, że ten powszechnie stosowany protokół tłumienia odporności zapobiega. regeneracja komórek. Może to stanowić częściowe alternatywne wyjaśnienie niepowodzenia przeszczepu wysepek w protokole Edmonton i cukrzycy po transplantacji. Rysunek 5SirTac hamuje. regeneracja komórek. (A) Leczenie za pomocą SirTac przez 14 dni bezpośrednio po odstawieniu doksycykliny spowodowało spadek o około 80%. proliferacja komórek zarówno u myszy typu dzikiego, jak iu cukrzycowych. Myszy leczono doksycykliną od urodzenia do miesiąca życia i uśmiercano 2 tygodnie później. (B) Kumulacja. komórki podczas leczenia SirTac, jak oceniono przez podawanie BrdU do wody pitnej pomiędzy odstawieniem doksycykliny i poświęceniem, w połączeniu z podawaniem SirTac jak w A
[podobne: trening pod sztuki walki, fundacja dzieciom zdążyć z pomocą logowanie, goździki właściwości lecznicze ]
[więcej w: techniki mma, kimura chwyt, łojotokowe zapalenie skóry głowy wypadanie włosów ]