Miejsce i mechanizm działania leptyny w postaci gryzoni wrodzonej lipodystrofii ad 6

Wcześniej sugerowano, że akumulacja nasyconych kwasów tłuszczowych w komórce może prowadzić do apoptozy (30). Dane te mogą sugerować, że zawartość lipidów i aktywność SCD-1 mogą również wpływać na. funkcja komórki lub żywotność. Poziomy triglicerydów, cholesterolu i FFA osocza nie ulegały zmianie u myszy abJ / abJ, aP2-nSREBP-1c w porównaniu z kontrolami PP2-nSREBP-1c (dane nie przedstawione). Leptyna poprawia działanie insuliny niezależnie od wpływu na stłuszczenie wątroby i aktywność SCD. Wyniki badań na myszach abJ / abJ, aP2-nSREBP-1c sugerują, że działanie przeciwcukrzycowe leptyny jest niezależne od jej zdolności do usuwania lipidów z wątroby i innych tkanek. W celu dalszego zbadania tej możliwości i mechanizmu leżącego u podstaw, wygenerowaliśmy krzywą dawka-odpowiedź dla podskórnej leptyny u myszy P2-nSREBP-1c. Celem tego badania było sprawdzenie, czy leptyna w zakresie poprawy cukrzycy była widoczna w tej samej dawce, co jej zdolność do zmniejszania stłuszczenia lub w innej dawce. Wstrzykiwaliśmy leptynę w dawce 12 ng / h, 25 ng / h, 50 ng / h i 100 ng / h, przy najwyższej dawce wynoszącej 200 ng / h, dawce, którą wcześniej wykazano zarówno w celu poprawy cukrzycy, jak i zmniejszenia stłuszczenia ( 9). Poziomy triglicerydów w wątrobie skorygowano do poziomu WT przy dawce lepkości 200 ng / h, podczas gdy redukcje były skromne przy niższych szybkościach wlewu (Figura 6a). Podobnie, poziomy mRNA SCD-1 (patrz Suplementowa Figura 2, http://www.jci.org/cgi/content/full/113/3/414/DC1) i aktywność SCD zostały skorygowane do poziomów WT tylko przy 200- ng / h wlew leptyny (Figura 6b). Figura 6 Krzywa odpowiedzi na dawkę do leczenia leptyną. Leptyna koryguje hiperinsulinemię i hiperglikemię w dawkach leptyny, które nie mają wpływu na aktywność SCD i ogólny wygląd wątroby (50 ng / h i 100 ng / h). (a) Zawartość triglicerydów w wątrobie. (b) aktywność enzymatyczną SCD mierzoną w ekstraktach wątrobowych myszy P2-nSREBP-1c potraktowanych kilkoma dawkami podskórnej leptyny. (cid) Poziomy glukozy i insuliny w osoczu odpowiednio. Paski błędów wskazują SE; n = 3 dla 12 ng / godz. i 25 ng / h leptyny, i n = 4 dla 0 ng / h, 50 ng / h, 100 ng / h, i 200 ng / h leptyny. * P <0,005, 200 ng / h dawki leptyny w porównaniu z dawką 0 ng / h. P <0,05, 50 ng / h dawka leptyny w porównaniu z dawką 0 ng / h. Podczas gdy aktywność SCD i poziomy triglicerydów w wątrobie znormalizowano tylko przy najwyższej dawce, obserwowano znaczące zmniejszenie zarówno poziomu glukozy w osoczu, jak i poziomu insuliny w osoczu przy 50 ng / h, 100 ng / h i 200 ng / h leptyny w dawkach. (Ryc. 6, c i d). Zatem leptyna poprawia cukrzycę w dawkach, które nie normalizują stłuszczenia wątroby lub zmniejszają aktywność SCD-1 do poziomu WT. Sugeruje to możliwość, że działanie przeciwcukrzycowe leptyny będzie niezależne od jej zdolności do hamowania ekspresji SCD-1 i zmniejszenia stłuszczenia. Zasadniczo leptyna może poprawić cukrzycę poprzez zwiększenie wychwytu glukozy lub zmniejszenie produkcji glukozy w wątrobie niezależnie od insuliny lub poprzez poprawę transdukcji sygnału insuliny. Aby rozróżnić te możliwości, badaliśmy działanie insuliny u myszy P2-nSREBP-1c po leczeniu dawką obwodowej leptyny (50 ng / h), która poprawia cukrzycę, ale nie poprawia stłuszczenia lub zmniejsza aktywność SCD-1 do poziomu WT (Figura 6). W wątrobach od myszy z lipodystrofią stwierdzono wyraźne zmniejszenie stymulowanej insuliną fosforylacji substratu receptora 2 (IRS-2) oraz zmniejszenie aktywności PI3K związanej z IRS-2. i aktywności Akt w porównaniu z tymi w wątrobach od zwierząt z WT. (Figura 7, a c). Traktowanie leptyną (50 ng / h) znormalizowało fosforylację IRS-2 stymulowaną insuliną i aktywność PI3K związaną z IRS-2 (3 i aktywność Akt w wątrobie myszy lipodystroficznych (Figura 7, a (cc). W mięśniu szkieletowym myszy z lipodystrofią obserwowano również spadek aktywności PI3K związanej z IRS-1 (3 i aktywność Akt. Jednak w tej tkance leczenie leptyną nie w pełni korygowało atenuowaną odpowiedź na insulinę (ryc. 7, d i e). Figura 7 Transdukcja sygnału nerwoinowego po leczeniu leptyną. Podskórna leptyna prowadzi do polepszenia sygnalizacji insuliny w wątrobie, ale nie w mięśniach myszy P2-SREBP-1c leczonych 50 ng / h podskórnej leptyny. (a) Wywołana przez insulinę fosforylacja tyrozyny cząsteczek IRS w wątrobie. (b) aktywności PI3K związane z białkami fosforylowanymi przez tyrozynę w wątrobie. (c) Aktywność kinazy AKT in vitro w wątrobie. Górne panele w punktach b i c pokazują reprezentatywne wyniki względnej analizy immunoblotów, aw dolnych panelach słupki błędu wskazują SE; n = 4. * P <0,05, WT wobec aP2-nSREBP-1c; P <0,05, aP2-nSREBP-1c w porównaniu z aP2-nSREBP-1c plus leptyna. (d) aktywności PI3K związane z białkami fosforylowanymi przez tyrozynę w mięśniach. (e) Aktywność kinazy AKT in vitro w mięśniach [więcej w: ankos zapasy warszawa, mma core, fundacja dzieciom zdążyć z pomocą logowanie ] [więcej w: mmacore, ankos zapasy warszawa, trening pod sztuki walki ]