Chimeryzm mieszany i tolerancja bez napromieniowania całego ciała w dużym modelu zwierzęcym czesc 4

Ponad 90% wyczerpania limfocytów T w krwi obwodowej osiągnięto w dniu 0 u zwierząt, które otrzymały 700 cGy TI i immunotoksynę anty-CD3, a ponad 98% wyczerpanie limfocytów T osiągnięto w dniu 0 u zwierząt, które otrzymały 1000 cGy TI i immunotoksyna. Ponadto, kilka pozostałych obwodowych komórek T prawie całkowicie pokryto przeciwciałem w dniu 0. Należy zauważyć, że zespół nieszczelności naczyniowej związany z leczeniem immunotoksyną (32, 33) nigdy nie zaobserwowano w tym protokole. Figura 2 Deplecja limfocytów T krwi obwodowej. (a) Bezwzględna liczba limfocytów T obecnych we wstępnej obróbce krwi obwodowej (dzień a2) i po podaniu TI (700 lub 1000 cGy) i pCD3-CRM9 (dni a i 0). (b) bezwzględna liczba komórek T pozostających w PB w dniu 0 dla każdego zwierzęcia. Brak znaczącej mielosupresji i toksyczności względem narządu w kondycjonowanych biorcach. Potencjalne toksyczności związane z tym podejściem monitorowano za pomocą kilku parametrów, w tym codziennej pełnej liczby krwinek i tygodniowych testów czynności kreatyniny i wątroby, w tym w przypadku transaminazy glutaminowo-oksalooctowej w surowicy i glutaminowej pirogronowej transaminazy w surowicy. Nie obserwowano żadnej toksyczności ze względu na schemat leczenia, a zarówno czynności nerek, jak i wątroby były zgodne z normą, z wyjątkiem krótkich udokumentowanych epizodów choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi (GvHD), które wystąpiły u zwierząt nos. 13100 i 13101. Figura 3 pokazuje krwinki białe (WBC) i liczbę płytek krwi u sześciu zwierząt leczonych zubożeniem komórek T i albo 700 cGy albo 1000 cGy TI. Liczba nadirów WBC na ogół wystąpiła w dniu 0 i wynosiła 2000. 7 000 /. L. Szybki wzrost liczby i stabilizacji liczby krwinek białych przy ponad 5000. L wystąpił w ciągu 2. 4 dni (Figura 3a). Tak więc klinicznie znacząca leukopenia nie była dostosowywana do przeszczepienia PBSC (PBSCT). Poziom płytek krwi ogólnie utrzymywał się na poziomie ponad 100 000 / L L, a infuzje płytek krwi nie były wymagane (Figura 3b). Ogólny stan zwierząt otrzymujących ten schemat leczenia był bardzo stabilny i infekcja nigdy nie była obserwowana. Figura 3Kliniczny przebieg zwierząt otrzymujących (700 lub 1000 cGy TI + DTCD3) na WBC (a) i płytkach krwi (PLT) (b). Analiza wszczepienia i tolerancji u zwierząt otrzymujących infuzję PBSC o dużej dawce SLA identycznej pod względem SLA. Chimeryzacja krwi obwodowej o wielu cząsteczkach. Chimeryzm mierzono za pomocą cytometrii przepływowej przy użyciu naszego mAb PAA, który rozpoznaje świniowy antygen alleliczny obecny na wszystkich leukocytach świńskich (26). Wybrane zostały zwierzęta dawcy i biorcy, odpowiednio PAA + i PAAa, w celu ułatwienia wykrywania chimeryzmu. Zwierzęta nos. 12757 i 12963 leczono 700 cGy Tl, pCD3-CRM9 0,05 mg / kg, 30 dni podawania CyA i 100 x 108 / kg infuzji PBSC identycznych z SLA. U obu zwierząt osiągnięto chimeryzm limfocytów i gwałtownie wzrosły one po 20 dniu osiągając maksimum 40% (Figura 4a). Jedno zwierzę wykazało przejściowy spadek chimeryzmu limfocytów po zaprzestaniu leczenia CyA. U obu zwierząt chimeryzm stopniowo zmniejszał się w dniach 40. 60, osiągając stabilny poziom 15. 20%, który utrzymywał się przez ponad 300 dni. Chimeryzm w liniach szpikowych (monocytach i granulocytach) występował na poziomie 5. 10% i był również utrzymywany przez ponad 300 dni. Figura 4Chimeryzm wśród zwierząt otrzymujących PBSCT z dopasowanym SLA. (a) Krew obwodowa; (b) grasicy. Chimeryzm grymaśny. Biopsje grzybów pobranych w ciągu pierwszych 2 tygodni ujawniły zanikowe zgrubienie u obu zwierząt po TI (dane nie przedstawione). W 20 dni po przeszczepie grasica zaczęła się rozwijać, co oceniono za pomocą wizualizacji w biopsji. Chimeryzm grasicy gwałtownie wzrósł w tym czasie, osiągając maksimum w dniu 45. Następnie chimeryzacja grasicy zmniejszyła się, stabilizując się na poziomie 5. 10% w dniu 60 i pozostając na tym poziomie przez ponad 300 dni u obu zwierząt (Figura 4b). Przeszczepy skóry. Przeszczepy skóry przeprowadzono w dniu 60 w celu zbadania pod kątem ustalenia tolerancji swoistej dla dawcy. Jedno zwierzę przyjmowało przeszczep skóry dawcy w nieskończoność (> 250 dni), a drugie zwierzę wykazywało przedłużone przeżycie przeszczepu skóry dawcy, ale zostało odrzucone w dniu 45. Oba zwierzęta odrzucały skórki przeszczepione przez MHC z udziałem osób trzecich całkowicie przez 10 dni (Tabela 2). . Jak pokazano na Figurze 4, oba zwierzęta osiągnęły pomyślne przeszczepienie limfo-polemo-komórkowe, a stabilne poziomy chimeryzacji grobowej i obwodowej utrzymywały się u tych zwierząt nawet po przeszczepieniu skóry. Znaczenie czasu przeżycia przeszczepu skóry jest omówione poniżej. Tabela 2 Przeżycie przeszczepów skóry chimerycznych świń identycznych pod względem SLA Wszczepienie zwierzętom otrzymującym infuzję PBSC o wysokiej dawce pojedynczego haplotypu 700 cGy TI
[więcej w: dieta przyspieszająca metabolizm jadłospis, ciasto marchewkowe wegańskie, centermed słoneczna tarnów ]
[hasła pokrewne: trening pod sztuki walki, techniki mma, kimura chwyt ]