Chimeryzm mieszany i tolerancja bez napromieniowania całego ciała w dużym modelu zwierzęcym ad 7

Jednakże ostatnio wykazano, że ten wymóg dotyczący miejsca można przezwyciężyć, zwiększając liczbę podawanych krwiotwórczych komórek macierzystych dawcy, tak zwaną. Megadozę. podejście (8, 9). Podejście to zostało zademonstrowane najpierw w przypadku syngenicznych przeszczepów szpiku kostnego (8, 9), a następnie wykazano, że umożliwia w pełni niedopasowane allogeniczne przeszczepianie szpiku kostnego, jeśli jest on kondycjonowany przez wyczerpanie TI i biorcy T (11). Dane są zgodne z możliwością, że nisze do wszczepienia podanych komórek macierzystych są wypełnione przez masowe działanie, i że efektem nisko dawkowego napromieniania jest opróżnienie niektórych nisz, przesuwając równowagę na korzyść podawanych komórek. Z drugiej strony takie napromieniowanie nie byłoby wymagane, gdyby inokulum dawcy było wystarczająco duże. Alternatywnym wyjaśnieniem tych wyników może być to, że WBI służy do zapewnienia wystarczającej immunosupresji gospodarza, aby umożliwić komórkom dawcy wszczepienie się poprzez stworzenie własnej przestrzeni (2). Jednakże poprzednia demonstracja porównywalnego efektu megadoses dla syngenicznego szpiku kostnego (8, 9) byłaby bardziej zgodna z hipotezą masowego działania. Pomimo podekscytowania wywołanego przez możliwość uniknięcia mieloablacji w protokołach BMT, zastosowanie podejścia megadosego do dużych zwierząt i ludzi było uważane za ograniczone, ponieważ dawki szpiku kostnego były 10-krotnie 100-krotnie większe od zwykłej dawki, co wymagało zbiorów, które w oczywisty sposób niemożliwe do zrealizowania od żywych dawców. Jednak pojawienie się technologii PBSC umożliwiło uzyskanie takich megadozowych ilości komórek macierzystych od żywych dawców poprzez stymulację za pomocą cytokin hematopoetycznych, a następnie leukafereza (39). Tak więc, w obecnych badaniach, leukafereza przez 3 kolejne dni, po tygodniu podawania cytokin, pozwoliła nam uzyskać kolekcję komórek jednojądrzastych 1,8 x 1011, ponad 50 razy więcej niż zwykle zbierano ze szpiku kostnego porównywalnych żywych dawców zwierząt. . Jak wykazano na podstawie histologii na Figurze 6 (b, e), tolerancja indukowana przez te komórki najprawdopodobniej obejmuje centralne delecje przez dendrytyczne komórki dawcy w grasicy. Jak wykazano tutaj, tolerancja została potwierdzona u tych zwierząt poprzez akceptację przeszczepów skóry lub przeszczepionych alloprzeszczepów organów bez immunosupresji. Innym ważnym aspektem schematu preparatywnego wymaganego do osiągnięcia wszczepienia bez WBI, jest skuteczne zmniejszanie dojrzałych limfocytów T od biorcy. Chociaż takie zubożenie było możliwe w przypadku surowic odpornościowych i przeciwciał monoklonalnych u myszy (40), podobne zubożenie u dużych zwierząt i ludzi było trudne (41, 42). Wcześniejsze badania na miniaturowej świni wykazały powleczenie obwodowych komórek T przez takie przeciwciała, bez skutecznego zubożenia (42). Jednakże użycie skoniugowanego z toksyną mAb anty-CD3 (pCD3-CRM9) umożliwiło teraz wyczerpanie w stopniu kompatybilnym z wszczepieniem (22). Wykazano, że stosowanie podobnej immunotoksyny jest skuteczne u naczelnych innych niż człowiek (43. 45). Protokoły kliniczne mogą ostatecznie polegać na takich immunotoksynach lub mogą być możliwe w przypadku nowych mAb, które wykazały znacząco skuteczne wyczerpywanie limfocytów T u ludzi (46, 47), ale których niestety nie można testować u naczelnych innych niż ludzie, ponieważ są one specyficzne dla gatunku. . Chociaż doniesiono, że immunotoksyny CD3 powodują zespół przecieków naczyniowych w niektórych protokołach (32, 33), u świń miniaturowych leczonych pCD3-CRM9 nie zaobserwowano żadnego zespołu przecieku naczyniowego w tym schemacie leczenia bez mielosupresji bez WBI. Ubytek dojrzałych komórek T biorcy i dawcy uzyskuje się u myszy z zastosowaniem dużych dawek nieskoniugowanych mAb. Przeciwciała te pozostają aktywne w osoczu biorcy przez 2 tygodnie po podaniu (48) i są uważane za odpowiedzialne za późniejsze zubażanie komórek T dawcy w inokulum szpiku kostnego, zapobiegając w ten sposób GvHD. Przeciwnie, wyczerpanie limfocytów T za pomocą pCD3-CRM9 obejmuje leczenie niską dawką skoniugowanego przeciwciała, które nie jest już aktywne w osoczu przed podawaniem PBSC dawcy (dane nie przedstawione). W związku z tym wykorzystaliśmy 30-dniowy cykl CyA w niniejszym protokole, próbując zapobiec indukcji GvHD przez komórki T dawcy. To leczenie skutecznie zapobiegało GvHD u biorców przeszczepów dobranych pod względem SLA, ale było tylko częściowo skuteczne w przypadku niedopasowanych przeszczepów SLA. W związku z tym, w przypadku niedopasowanego transplantacji, następnie zwiększyliśmy leczenie CyA przez zwężenie o dodatkowe 30 dni, a nasze wstępne dane wskazują, że to dodatkowe leczenie jest skuteczne w zapobieganiu temu powikłaniu (Y. Fuchimoto i wsp., Manuskrypt w przygotowaniu)
[patrz też: dieta przyspieszająca metabolizm jadłospis, najlepsza odzywka do rzes, mma core ]
[przypisy: powiększone węzły chłonne w jamie brzusznej, goździki właściwości lecznicze, mleko w proszku dla dzieci ]