Chimeryzm mieszany i tolerancja bez napromieniowania całego ciała w dużym modelu zwierzęcym ad 6

Stosując swoiste dla dawcy mAb klasy I, komórki dawcy wyraźnie obserwowano w regionie rdzeniastym. Podwójne barwienie za pomocą klasy I dawcy (niebieski) i cytokeratyny (brązowy) na Figurze 6d wykazało, że komórki dawcy w rdzeniu nie były komórkami nabłonkowymi, podczas gdy podwójne barwienie dla klasy I dawcy (niebieski) i klasy II świni (brązowe) ) na Figurze 6e wykazało, że komórki dawcy były pozytywne w klasie II, a ich morfologia była zgodna z typem komórek dendrytycznych (Figura 6e). U obu tych zwierząt obserwowano kliniczne objawy GvHD, w tym wysypkę skórną stopnia (2 i biegunkę, natychmiast po ustaniu podawania CyA. Wysypka skórna zniknęła spontanicznie u obu zwierząt. Jednak zwierzę nie. 13100 trzeba było poświęcić w 73 dniu z powodu uporczywej biegunki. Badanie patologiczne potwierdziło, że zwierzę to cierpiało na powikłania przewlekłej GvHD, a nie na toksyczność spowodowaną schematem preparatywnym. W nr. Zwierzęcia 13101, biegunka zniknęła spontanicznie, a zwierzę wyglądało zdrowo w 90 dniu i pozostawało zdrowe przez ponad 400 dni. Indukcja tolerancji oceniana przez alloprzeszczepy nerkowe. W dwóch z tych długoterminowych zwierząt z mieszanym chimeryzmem (nr 13101 i 13476), przetestowaliśmy indukcję tolerancji przez przeszczepienie alloprzeszczepu nerkowego dopasowanego dawcy MHC. Liczba zwierząt. 13101 i 13476 otrzymały allograft nerki dobrany dawcy, odpowiednio po dniach 190 i 98 po PBSCT. W obu przypadkach dawcą PBSC i dawcą aloprzeszczepu nerki były różne zwierzęta, prawdopodobnie różniące się dla wielu pomniejszych różnic antygenu. W obu przypadkach nerki były akceptowane długoterminowo bez stosowania leków immunosupresyjnych po transplantacji nerki. Jak pokazano na Figurze 7a, oba zwierzęta wykazały przemijające zwiększenie stężenia kreatyniny w osoczu w dniu pooperacyjnym (POD) 17, jak opisano wcześniej w tym modelu dla dobranych pod względem SLA alloprzeszczepów nerkowych różniących się pod względem niewielkich różnic antygenu (35). Następnie kreatyniny ustabilizowały się, a zwierzęta nadal cieszyły się prawidłową czynnością nerek z poziomem kreatyniny w osoczu wynoszącym mniej niż 1,5 mg / dl przez ponad 120 dni. U obu zwierząt, biopsje nerki wykazały minimalny naciek śródmiąższowy z komórkami jednojądrzastymi na POD 30, 60 i 100. Odkrycia te są odmienne od wcześniej zgłoszonych danych dla zwierząt otrzymujących jedno-haplotypowe niepasujące allogenty nerki bez immunosupresji, z których wszystkie odrzuciły przeszczepy nerki do dnia 12 (36). Reprezentatywne zwierzę kontrolne (nr 10653) pokazano na Figurze 7a. Figura 7 (a) Poziomy kreatyniny w osoczu dla pojedynczych haplotypów niedopasowanych chimerowych receptorów, które otrzymały dobroczynne allele typu nerki dobrane MHC bez immunosupresji: Zwierzęta nie. 13101 i nie. 13476 były chimerycznymi zwierzętami, które otrzymały dobroczynne alloprzeszczepy nerki dobrane MHC; nr. 10653 było naiwnym zwierzęciem, które otrzymało pojedynczy heteroprzeszczep o nieprawidłowym przeszczepie nerki. (b) e) tolerancja swoista dawcy i immunokompetencja pojedynczego chimerycznego zwierzęcia o niedopasowanym haplotypie. 13101: odpowiedzi CTL naiwnego zwierzęcia SLAad (b) i zwierzęcia nr. 13101 przed PBSCT (c); po PBSCT, ale przed przeszczepem nerki (KTx) (d); i po KTx (e). Każdy wykres pokazuje odpowiedź SLAac anty-self SLAad (otwarte kwadraty), SLAac anty-dawcy (zamknięte kwadraty) i anty-trzeciorzędową odpowiedź świń Jukatan (otwarte trójkąty). Dowody in vitro na tolerancję i wykazanie immunokompetencji. Figura 7 (b. E) pokazuje wyniki CML dla zwierzęcia nr. 13101 (SLAad), w porównaniu z odpowiedziami nieleczonego zwierzęcia typu gospodarza (SLAad), biegną jako kontrola w każdym teście (Figura 7b). Jak również widać na Fig. 7, nr. 13101 wykazał znaczącą odpowiedź SLAac przeciwko dawcy (> 20%) przed otrzymaniem PBSC (Figura 7c). Jednak po podaniu PBSC, zarówno przed (Figura 7d), jak i po (Figura 7e) przeszczepie nerek, to zwierzę wykazało niespecyficzność specyficzną dla dawcy w CML. Immunokompetencja została wykazana we wszystkich przypadkach przez wysoką anty-trzecią reakcję na miniaturową świnkę z Yucatan (Charles River Breeding Lab, Windham, Maine, USA). Wyniki mieszanych reakcji limfocytów również wykazały znaczące odpowiedzi przeciwko dawcy przed podaniem PBSC i specyficzną dla dawcy niereaktywność i immunokompetencję po podaniu PBSC (dane nie przedstawione). Omówienie Protokoły dotyczące indukcji chimeryzmu limfohematopoetycznego za pomocą BMT zazwyczaj zawierały WBI jako część schematu preparatywnego (37, 38). Nawet w sytuacjach, w których immunosupresję biorcy osiągnięto przez zastosowanie przeciwciał przeciwko komórkom T, ogólnie uważano, że pewien poziom WBI był nadal niezbędny do spowodowania. Pokoju. dla przeszczepu krwiotwórczych komórek macierzystych dawcy (1, 37)
[hasła pokrewne: ciasto z truskawkami moje wypieki, masaż nuru na czym polega, kimura chwyt ]
[podobne: koszt rezonansu magnetycznego, dieta przyspieszająca metabolizm jadłospis, ciasto marchewkowe wegańskie ]