białko c-Fos jako cel przeciwsteoblastogennego działania witaminy D i synteza nowych analogów ad 5

Dolne prążki w A pokazują Paktynę jako wewnętrzną kontrolę obciążenia białkiem. Wypełnione kółka, prostokąty i trójkąty (B i C) oznaczają odpowiednio DD281, DD280 i DD208. Dane wyrażono jako procent wartości dla kultur traktowanych podłożem. Przetestowaliśmy jeden z silnych analogów, DD281, dla jego aktywności farmakologicznej in vivo. Głównym działaniem hormonu witaminy D jest stymulowanie wchłaniania wapnia przez jelita, a jego terapeutycznie korzystne działanie w kości jest często osłabione przez działania uboczne, takie jak hiperkalcemia i hiperkalciuria, zwłaszcza gdy zwiększa się dawkę. DD281, który jest chemicznie (1R, 3S, 5Z) -5 – [(2E) – [(3aS, 7aS) -1 – [(1R) -1 – [(2-etylo-2-hydroksybutylo) tio] etylo] -3,3a, 5,6,7,7a-heksahydro-7a-metylo-4H-inden-4-ylideno] etylideno] -4-metyleno-1,3-cykloheksanodiol (Figura 9A) ma powinowactwo wiązania do VDR, który jest w przybliżeniu 84% tej z 1, 25 (OH) 2D3; ma również bardzo krótki okres półtrwania w krążeniu [mniej niż godzinę w porównaniu z 8. 10 godzin dla (3, 25 (OH) 2D3 przy podawaniu doustnym], prawdopodobnie z powodu jego bardzo małego powinowactwa do białka wiążącego witaminę D3 [ 0,3% tej z 1, 25 (OH) 2D3]. Określiliśmy dawki DD281, które miały wpływ na wchłanianie wapnia podobne do działania (3, 25 (OH) 2D3 przez oszacowanie wydalania wapnia z moczu u myszy z niedoborem estrogenów z wyciętymi jajnikami (OVX). Jak podsumowano na Figurze 9B, niższa dawka DD281 (5 .g / kg masy ciała) lub l, 25 (OH) 2D3 (0,0125 .g / kg masy ciała) nie zmieniła 24-godzinnego wydalania wapnia z moczem, podczas gdy wyższa dawka każdego [10 .g / kg dla DD281 i 0.05 .g / kg dla (3, 25 (OH) 2D3] spowodowała podobny wzrost wydalania wapnia z moczem. Przy takim samym stopniu wpływu na metabolizm wapnia DD281 zapobiegał utracie masy kostnej znacznie istotniejszej i silniejszej niż 1, 25 (OH) 2D3 w odcinku lędźwiowym kręgosłupa (Figura 9C). Również DD281 zmniejszał liczbę osteoklastów i powierzchnię kości pokrytą osteoklastami bardziej istotnie i silniej niż 1, 25 (OH) 2D3 w odcinku lędźwiowym kręgosłupa (tabela 1). Żadne z leków nie powodowało hiperkalcemii, chociaż wyższa dawka 1, 25 (OH) 2D3 powodowała nieznaczne, ale znaczące zwiększenie stężenia wapnia w surowicy, tylko w porównaniu z tymi u myszy OVX leczonych podłożem (Tabela 2). Tak więc, DD281 było lepsze od (3, 25 (OH) 2D3 w działaniu przeciwresorpcyjnym i chroniącym kości, mając taki sam wpływ na metabolizm wapnia, jak naturalny hormon. Figura 9 Nowy analog witaminy D, DD281, hamuje różnicowanie osteoklastów i zwiększa BMD silniej niż 1, 25 (OH) 2D3 in vivo. (A) Struktury a, 25 (OH) 2D3 i jego analog, DD281. (B) Myszy C57BL / 6J poddane Ovariektomii (OVX) traktowano doustnie wskazanymi dawkami (3, 25 (OH) 2D3 lub jego analogiem DD281 przez 4 tygodnie, a wydalanie wapnia z moczu oznaczano przez ostatnie 24 godziny. * P <0,05 w porównaniu z grupą OVX z traktowaniem nośnikiem, P <0,05 w porównaniu z grupą pozorowaną, n = 8 w każdej grupie. (C) Oznaczono BMD w kręgach lędźwiowych. * P <0,05 w porównaniu z grupą OVX z leczeniem z użyciem nośnika, ** P <0,005 w porównaniu z grupą OVX z leczeniem w podłożu, *** P <0,0005 w porównaniu z grupą OVX z leczeniem podłożem, P <0,05 w porównaniu z grupą pozorowaną, n = 8 w każdej grupie. Tabela Wpływ 1., 25 (OH) 2D3 i DD281 na parametry osteoklastów u myszy OVX Tabela 2 Biochemia krwi i moczu u myszy OVX leczonych 1., 25 (OH) 2D3 lub DD281 Dyskusja Hipokalcemia i krzywica / osteomalacja obserwowane w VDR myszy z genem KO, a także u pacjentów z niedoborem witaminy D wskazują na fizjologiczne znaczenie VDR w utrzymaniu homeostazy wapnia i mineralizacji kości (22). Jeśli chodzi o farmakologię, znaczenie witaminy D jako składnika odżywczego w zapobieganiu osteoporozie jest dobrze rozpoznane, zwłaszcza w populacji osób starszych, w których występuje powszechny niedobór witaminy D (23, 24). Jednakże, użyteczność hormonu witaminy D u pacjentów z osteoporozą, nawet w zakresie wystarczalności witaminy D, i to, czy ma ona jakieś szczególne właściwości pod względem działania kości nie wykazane przez zwykłą witaminę D, była kontrowersyjna (25, 26) . Powszechnie uważa się, że (3, 25 (OH) 2D3 stymuluje resorpcję kości, w oparciu o fakt, że w klasycznym eksperymencie wykorzystującym hodowle narządów kostnych (27) stwierdzono, że jest hormonem resorpcji kości i że 1. 25 (OH) 2D3 indukuje ekspresję RANKL, niezbędnej cytokiny do rozwoju osteoklastów (28). W niniejszym badaniu dostarczyliśmy biochemiczne, a także histologiczne dowody na to, że hormon witaminy D może wywierać działanie farmakologiczne w celu zahamowania resorpcji kości w warunkach patologicznych przy nadmiernym wytwarzaniu osteoklastów. [patrz też: czarna porzeczka odmiany, koszt rezonansu magnetycznego, nr na pogotowie ratunkowe ] [więcej w: dieta przyspieszająca metabolizm jadłospis, ciasto marchewkowe wegańskie, powiększone węzły chłonne w jamie brzusznej ]